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SBI無外泌體血清的樣品制備知識(shí)探究

  • 發(fā)布日期:2020-07-17      瀏覽次數(shù):858
    •    SBI無外泌體血清可特異性激發(fā)一些細(xì)胞反應(yīng),表明它們可以在作為治療遞送載體方面有巨大的潛力。無外泌體血清的囊泡性質(zhì)使得它們適合作為用于藥物或核酸遞送的潛在納米載體。無外泌體血清的大小分布也會(huì)影響外泌體的治療潛力。利用聚合物沉淀分離的外泌體比超離法的粒子分布要小,劃痕實(shí)驗(yàn)證實(shí)聚合物沉淀所得的小粒徑的外泌體被細(xì)胞攝取后遷移更快。
        SBI無外泌體血清常規(guī)血液制備可分為兩類,即抗凝血和非抗凝血:
        1.抗凝血常
        采血前,預(yù)先在采血管中加入抗凝劑(EDTA或肝素鈉)采集血液完畢后密封貼上標(biāo)簽,低溫冷藏運(yùn)送到實(shí)驗(yàn)室。必要時(shí)需要可在血液中加入雙抗(鏈霉素和青霉素)以抑制血源性或采血過程中污染細(xì)菌。
        其中EDTA是一種強(qiáng)力抗凝劑,既能抗凝又能保護(hù)DNA,所以可以作為核酸檢測(cè)中使用的抗凝劑好;而肝素鈉因?yàn)槠鋵?duì)DNA聚合酶的強(qiáng)烈抑制性,造成PCR檢測(cè)出現(xiàn)假陰性,也可造成紅細(xì)胞吸附試驗(yàn)(HAD)假陽性,所以采血過程應(yīng)當(dāng)做好抗凝劑的選取。
        2.非抗凝血
        即不加抗凝劑的血液,待血液凝固后析出血清可做血清學(xué)檢測(cè)試驗(yàn)。
        SBI無外泌體血清的分離方法:
        夏日將血液室溫傾斜靜置1-2小時(shí)(防止暴曬),待血液凝固,自然析出血清即可收集。冬日將收集管放置在25-37°環(huán)境中1小時(shí),必要時(shí)使用離心機(jī)低速,低溫離心處理,1500-2500轉(zhuǎn)/分離心5分鐘。待血清析出后分裝到小塑料離心管內(nèi),蓋緊蓋子,封口,標(biāo)記,4℃冷藏;需長期保存時(shí),將血清置于-20℃冷凍即可。
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