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hyclone胎牛血清解凍后發(fā)現(xiàn)有絮狀沉淀物出現(xiàn),該如何處理?

  • 發(fā)布日期:2022-11-23      瀏覽次數(shù):510
    •   hyclone胎牛血清解凍后發(fā)現(xiàn)有絮狀沉淀物出現(xiàn),該如何處理?
       
        hyclone胎牛血清中沉淀物的出現(xiàn)有許多種原因,但普遍的原因是由于血清中脂蛋白的變性所造成,而血纖維蛋白(形成凝血的蛋白之一)在血清解凍后,也會(huì)存在于血清中,亦是造成沉淀物的主要原因之一。但少量這些絮狀沉淀物,并不影響血清本身的質(zhì)量。若您欲去除這些絮狀沉淀物,可以將血清分裝至無菌離心管內(nèi),以400g 稍微離心,上清液即可接著加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾。我們不建議您以過濾的方法去除這些絮狀沉淀物,因?yàn)樗赡軙?huì)阻塞您的過濾膜。
       

      胎牛血清

       


       
        hyclone胎牛血清注意事項(xiàng):
       
        1.血清解凍與存放:-20℃取出后建議放入2~8℃冰箱中解凍約,每隔一段時(shí)間輕輕搖晃均勻,不可直接放入溫度較高處解凍,避免因溫度改變太大,造成蛋白質(zhì)凝集而出現(xiàn)沉淀,血清的質(zhì)量下降。若短期無法用完一瓶,建議無菌分裝,再放回冷凍,避免反復(fù)凍融。4℃長時(shí)間保存后血清中的變性脂蛋白及纖維蛋白,形成絮狀物質(zhì)變差。
       
        2.血清是否滅活:加熱可滅活血清中補(bǔ)體系統(tǒng),在少數(shù)情況下(培養(yǎng)ES細(xì)胞,平滑肌細(xì)胞時(shí))建議滅活,在培養(yǎng)其余細(xì)胞時(shí)不建議滅活血清。血清滅活非常容易產(chǎn)生沉淀,如必須滅活請(qǐng)按56℃,30min,輕微搖晃原則操作,滅活溫度高、時(shí)間長、搖晃不均都容易產(chǎn)生沉淀。
       
        3.無血清培養(yǎng)基:無血清培養(yǎng)基在結(jié)果重復(fù)性、細(xì)胞體外分化方面有優(yōu)勢(shì),但是,血清仍然是培養(yǎng)液中基本的添加物,尤其是在原代培養(yǎng)或細(xì)胞生長狀態(tài)不良時(shí),常常會(huì)先使用有血清的培養(yǎng)液進(jìn)行培養(yǎng),待細(xì)胞生長旺盛后再換成無血清培養(yǎng)液。
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